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北京六一生物科技有限公司

紫外可見分光光度計的雙向導數(shù)光譜法(二)

2015-10-22 類型:新聞資訊
基于零相移濾波器原理,雙向導數(shù)光譜法能夠有效地消除相移。

實驗設備及操作:

   SP-1902紫外可見分光光度計,波長掃描范圍200—1000nm , 光譜帶寬為0.1nm,波長精確度為4-2.0nm且波長的重復性為1.0nm。(上海光譜儀器有限公司)

   電子天平Sout SL (奧豪斯國際貿易(上海)有限公司)

   水楊酸和磷酸三鈉 (國藥集團化學試劑有限公司)

   水楊酸溶液:稱取 0.1g的水楊酸,溶于200mL磷酸鹽緩沖液中,配成O.5g/L的儲備液。再配制40mg/L的水楊酸溶液。用紫外可見分光光度計掃描上述溶液,取磷酸鹽緩沖液為參比,可得232~328nm的吸收光譜。

   水楊酸溶液的紫外可見吸收光譜相對簡單,表明水楊酸在波長260~320nm之間的最大吸收峰在299nm。原始的掃描譜缺少吸收細節(jié),而導數(shù)光譜則能提供更多的吸收信息。因此,用傳統(tǒng)的導數(shù)光譜法和雙向導數(shù)光譜法同時對原始吸收數(shù)據(jù)進行處理。

   傳統(tǒng)的一階導數(shù)光譜信號重疊和低頻成分的信號多,圖形相對簡單,分辨率較低,缺少吸收細節(jié)。相反,一次雙向導數(shù)光譜在該波長范圍內有更多的吸收細節(jié),且消除了低頻成分的影響。雙向導數(shù)由兩個一階導數(shù)系統(tǒng)串聯(lián)而成,實際上是一個二階系統(tǒng),因此,雙向導數(shù)光譜應與傳統(tǒng)的偶數(shù)階導數(shù)光譜相比較。

   雙向導數(shù)光譜具有零相移,因此得到的吸收細節(jié)相對原始吸收光譜沒有偏移。一次雙向導數(shù)光譜與傳統(tǒng)的二階導數(shù)光譜具有相同的幅值,但傳統(tǒng)的二階導數(shù)在相移的影響下振幅值正負反向,且光譜向右平移了1nm,使得該吸收峰對應的波長點變?yōu)?00nrn。二次雙向導數(shù)光譜與傳統(tǒng)的四階導數(shù)光譜具有相同的幅值,而后者向右平移了2nm。三次雙向導數(shù)光譜與傳統(tǒng)的六階導數(shù)光譜也具有相 同的幅值,但傳統(tǒng)的六階導數(shù)光譜向右平移了3nm。此外,三次雙向導數(shù)光譜同樣消除了傳統(tǒng)導數(shù)光譜振幅值的正負反向。

   本文提出了紫外可見分光光度計的雙向導數(shù)光譜法。通過對水楊酸溶液的紫外可見分光光度計吸收光譜的分析,認為雙向導數(shù)光譜法能有效消除傳統(tǒng)導數(shù)光譜法中的相移,避免了振幅值正負反向以及群時延效應帶來的波形畸變和波長位置偏移。因此,雙向導數(shù)光譜法能夠提供 更準確的波長吸收細節(jié),更好地解決紫外可見分光光度計復雜組分定性、定量分析結果不理想的難題。

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